圣安德鲁斯大学选择NanoSight NTA系统对外泌体进行表征
世界领先的纳米粒子表征技术制造商NanoSight报告称,圣安德鲁斯大学医学院正在使用纳米粒子跟踪分析(NTA)来表征外泌体行为。
圣安德鲁斯大学的西蒙·波伊斯博士和他的同事们正在研究一组参与免疫系统防御细胞内病原体的分子是如何发挥作用的。这些分子被称为主要组织相容性复合体(MHC) I类分子,它们在体内几乎每个细胞上都有表达。它们与医学的关联是众所周知的,因为它们是器官移植时必须紧密匹配的关键基因集之一,否则移植会产生排斥反应。现在已经知道,它们在正常免疫系统中的确切作用是将降解病毒蛋白的小片段结合到免疫系统的T淋巴细胞上。这允许特异性检测“外来”蛋白质,即来自潜在病原体的蛋白质,并允许免疫系统特异性检测和杀死受感染的细胞,同时不影响相邻的未受感染的细胞。此外,还有一种有趣的自身免疫疾病与MHC I类分子的一种特殊类型密切相关。有一种叫做强直性脊柱炎的炎症性关节炎会影响脊柱,90%以上的患者会表达一种叫做HLA-B27的MHC I类分子。这种关节炎和HLA-B27之间的联系已经被知道了近40年,但疾病机制和HLA-B27是如何参与的尚不清楚。
当Powis小组研究外泌体上表达的MHC I类分子时,发现它们可以表达一种新的结构类型。位于外泌体内部的MHC I类分子的尾部区域,可以经常与另一个MHC I类分子形成二硫键连接,从而使两个分子紧密结合在一起形成二聚体结构。这通常不会发生在细胞上,因为细胞质有一个还原环境,阻止二硫键的形成。然而,在外泌体中,维持还原环境的能力似乎已经丧失。该小组目前正在研究免疫系统的细胞是否能在外泌体上看到这些MHC I类二聚体结构并对其做出反应。另一个关键问题是在外泌体上发现了哪些肽与MHC I类分子结合。外泌体的产生途径不是MHC I类分子到达细胞表面的正常途径,因此在这个外泌体MHC I类分子子集中发现不同肽的可能性是真实存在的。为了能够从各种免疫细胞中研究这些外泌体,有必要检测它们在培养物中的存在和大小。这就是该团队选择NanoSight NTA方法与LM10系统的原因。
在使用NanoSight之前,流式细胞术已被证明是免疫细胞释放的外泌体初步特征的有价值的工具。Powis博士说:“NanoSight方法可以更准确地测定纯化前后的大小和相对浓度。这使我们能够监测外泌体在30-150nm范围内的释放,在各种与正常和异常免疫反应相关的免疫刺激激活后,以一种以前用流式细胞术无法看到的方式。”
要了解更多关于纳米颗粒表征使用纳米颗粒跟踪分析,NTA,请访问公司网站(www.nanosight.com),并登记订阅该公司最新一期的电子通讯NanoTrail。
圣安德鲁斯大学的西蒙·波伊斯博士和他的同事们正在研究一组参与免疫系统防御细胞内病原体的分子是如何发挥作用的。这些分子被称为主要组织相容性复合体(MHC) I类分子,它们在体内几乎每个细胞上都有表达。它们与医学的关联是众所周知的,因为它们是器官移植时必须紧密匹配的关键基因集之一,否则移植会产生排斥反应。现在已经知道,它们在正常免疫系统中的确切作用是将降解病毒蛋白的小片段结合到免疫系统的T淋巴细胞上。这允许特异性检测“外来”蛋白质,即来自潜在病原体的蛋白质,并允许免疫系统特异性检测和杀死受感染的细胞,同时不影响相邻的未受感染的细胞。此外,还有一种有趣的自身免疫疾病与MHC I类分子的一种特殊类型密切相关。有一种叫做强直性脊柱炎的炎症性关节炎会影响脊柱,90%以上的患者会表达一种叫做HLA-B27的MHC I类分子。这种关节炎和HLA-B27之间的联系已经被知道了近40年,但疾病机制和HLA-B27是如何参与的尚不清楚。
当Powis小组研究外泌体上表达的MHC I类分子时,发现它们可以表达一种新的结构类型。位于外泌体内部的MHC I类分子的尾部区域,可以经常与另一个MHC I类分子形成二硫键连接,从而使两个分子紧密结合在一起形成二聚体结构。这通常不会发生在细胞上,因为细胞质有一个还原环境,阻止二硫键的形成。然而,在外泌体中,维持还原环境的能力似乎已经丧失。该小组目前正在研究免疫系统的细胞是否能在外泌体上看到这些MHC I类二聚体结构并对其做出反应。另一个关键问题是在外泌体上发现了哪些肽与MHC I类分子结合。外泌体的产生途径不是MHC I类分子到达细胞表面的正常途径,因此在这个外泌体MHC I类分子子集中发现不同肽的可能性是真实存在的。为了能够从各种免疫细胞中研究这些外泌体,有必要检测它们在培养物中的存在和大小。这就是该团队选择NanoSight NTA方法与LM10系统的原因。
在使用NanoSight之前,流式细胞术已被证明是免疫细胞释放的外泌体初步特征的有价值的工具。Powis博士说:“NanoSight方法可以更准确地测定纯化前后的大小和相对浓度。这使我们能够监测外泌体在30-150nm范围内的释放,在各种与正常和异常免疫反应相关的免疫刺激激活后,以一种以前用流式细胞术无法看到的方式。”
要了解更多关于纳米颗粒表征使用纳米颗粒跟踪分析,NTA,请访问公司网站(www.nanosight.com),并登记订阅该公司最新一期的电子通讯NanoTrail。